代谢组学及其在药用植物研究中的应用

指出了代谢组学是继基因组学和蛋白组学之后新兴的一门研究生物体内源代谢物的种类、数量及其在内外因素作用下变化规律的组学技术,是以组群指标分析为基础,以高通量检测和数据处理为手段,以信息建模与系统整合为目标的系统生物学的一个分支.近年来,随着代谢组学积累的数据和信息量的增大,其在药用植物学各个领域的应用价值也与日俱增.主要对代谢组学的产生、研究方法和技术及其在药用植物研究中的应用进行了阐述,以期为相关研究提供参考.     

啤酒厂废水处理活性污泥中一株细菌的分离与鉴定

从某啤酒厂废水的活性污泥中分离纯化了一株微生物菌株Z-1,分析了该菌株的16S rDNA基因序列及形态特征,测定了该菌株的生长曲线、对抗生素的耐药性及该菌株的曝气池污水氮、磷含量.结果表明:该微生物为芽孢杆菌属细菌(Bacillus),生长较快,对抗生素的耐药性弱,对废水中N、P去除较多,为筛选活性污泥法处理啤酒废水的高效菌株奠定基础.     

bHGA对体外培养成骨细胞活性的影响

为探讨12b-羟基-去-D-杰氏山竹子素A(bHGA)的体外潜在成骨活性,用bHGA处理MC3T3-E1成骨细胞,研究了其对细胞碱性磷酸酶活性、矿化、骨相关基因表达及早期成骨分化相关基因表达水平的影响.结果表明:bHGA处理细胞后,对Runx2 mRNA表达无显著影响,而对Osx mRNA的表达具有一定抑制作用.bHGA能同时促进骨钙蛋白基因OCN和Ⅰ型胶原Col 1 mRNA的表达,但抑制碱性磷酸酶mRNA的表达,其对骨桥蛋白基因OPN mRNA的表达没有显著影响.说明bHGA不利于骨早期分化,但它通过促进骨钙蛋白和I型胶原mRNA的表达而促进骨成熟.     

端羟基超支化聚酯的制备及改性

以2,2-二羟甲基丙酸和季戊四醇(核)为原料,财甲苯磺酸为催化剂,合成了超支化聚醇(B),用顺丁烯二酸酐进行了部分端基改性.探讨了溶剂对端基超支化聚醑改性的影响,对改性后的超支化聚酯进行水溶性测定,通过FI-IR和1HNMR图谱对超支化聚醋及不同溶剂中改性的聚酯进行了表征.结果表明:将端羟基(-OH)改性为羧基(-COOH)后,超支化聚酯的水溶性增加;用丙酮做溶剂可得到改性度更高的超支化聚醇,且更易于纯化.     

双酚A在纳米羟基磷灰石修饰碳糊电极上的电化学行为及分析应用

制备了一种纳米羟基磷灰石修饰碳糊电极(Nano-HAP-CPE),并建立了一种灵敏、简便的检测双酚A(BPA)的电化学分析方法.采用循环伏安法(CA)、计时库仑法(CC)、线性扫描法(LSV)和差分脉冲伏安法(DPV)等研究了BPA在Nano-HAP-CPE电极上的电化学行为,得到电化学动力学参数并优化检测条件.结果表明:Nano-HAP-CPE电极对BPA有良好的富集作用,在pH7.0的磷酸盐缓冲溶液(PBS)中,BPA在0.468 V处有一个明显的氧化峰.在最佳条件下,氧化峰电流与BPA浓度在8.00×10-8～1.25×10-5 mol/L范围呈线性关系,检出限4.50×10-8 mol/L,并用此方法测定了聚碳酸酯塑料瓶中BPA的含量,回收率为96.10％～103.1％.     

细菌光敏色素PCB-AphA（26—320）体内重组与条件优化

为验证鱼腥藻PCC7120细菌光敏色素脱辅基蛋白AphA（26—320）与藻蓝胆素（PCB）异源体内重组的可行性，并获取光化学活性高、表达量大的细菌光敏色素，通过多个目的蛋白在单个大肠杆菌细胞体内共表达的方式，促使鱼腥藻PCC7120细菌光敏色素脱辅基蛋白AphA（26—320）与藻蓝胆素（PCB）的在异源细胞内进行自催化连接．吸收光谱所产生的可逆光致变色效应显示，AphA（26—320）与藻蓝胆素进行了正确的体内重组，AphA（26—320）脱辅基蛋白与藻蓝胆素在体内完成了自催化共价连接；在此过程中还发现：在生长浓度达到OD600=0．6时，冰浴30min，一次性加入终浓度为1mmol／L的IPTG，于30℃，摇床速度为100r／min的条件下诱导表达12～15h可取得较好的效果．     

稻瘟病抗性基因Pita~2的克隆及其介导的防御相关基因表达分析

为了克隆位于水稻12号染色体着丝粒区域具有广谱抗性的稻瘟病抗性基因Pita~2,研究构建并筛选了该基因供体品种PiNo.4的Fosmid文库,构建Pita~2候选区域的物理图谱并互补验证了5个候选基因,克隆得到了稻瘟病抗性基因Pita~2,确认了该基因就是Ptr基因.一组基因型接近、对Pita~2致病性相反的稻瘟病菌菌株对水稻进行离体接种,接种前后相关防御基因的表达量分析结果表明,Pita~2基因在稻瘟病菌侵染后均成功激活了水杨酸和茉莉酸抗病信号通路,主要通过参与水稻水杨酸信号通路赋予水稻抗性,该研究为利用Pita~2培育持久广谱抗性水稻提供了一定的理论基础.     

具有抗农作物病原真菌活性链霉菌Ⅰβ1菌株的筛选鉴定及其聚酮合酶基因分析

从土壤中筛选出一株具有抗农作物病原真菌活性链霉菌,命名为Ⅰβ1.根据生理生化特性对其进行了鉴定及16S rRNA基因序列同源性比对,分析了该菌株的发酵滤液抑菌稳定性和聚酮合酶基因.结果表明:该菌株初步鉴定为链霉菌属,Ⅰβ1菌株发酵滤液在温度为-20~55℃,紫外线照射10~30 min,pH为1.0~9.0条件下均较稳定,聚酮合酶基因在其系统分类上与Streptomyces noursei ATCC 11455制霉菌素生物合成基因簇的聚酮合酶基因分枝较近.     

一个药用野生稻异源单体附加系在减数分裂时期的GISH分析鉴定

异源单体附加系是从亲缘关系较远或属间的一个物种单条染色体附加到另一个物种中．栽培稻珍籼97B与药用野生稻Hy18杂交与连续回交，在BC2后代中得到一个药用野生稻单体附加系．生物素标屺的药用野生稻总DNA作为探针，未标记的栽培稻总DNA封阻，对其异源单体系减数分裂染色体进行基因组原位杂交．FISH结果表明，在栽培稻（AA，2n=24）基因组中附加了一条药用野生稻染色体，并鉴定为第8号染色体．研究表明，药用野生稻异源单体附加系的建立为药用野生稻的基因组学和遗传学的研究提供一个新的操作平台．而GISH技术在水稻远缘杂交育种中是最准确有效的染色体鉴定方法．在水稻育种改良中具有重要应用前景．     

酵母细胞中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的分离纯化及性质

报道了葡萄糖-6磷-酸脱氢酶（G6PDH）的分离纯化和酶学性质研究．以溶胀法从酵母细胞中提取胞内酶，粗抽提液再经过硫酸铵盐析和Sephadex G-100凝胶柱层析．酶学性质研究结果表明：G6PDH的酶促反应最适温度和pH值分别为37℃和pH8．8．考察了金属离子对G6PDH荧光光谱的影响，发现Cu^2＋和Hg^2＋对G6PDH具有荧光猝灭作用，且符合荧光静态猝灭的Stern—Volmer公式，因此可利用荧光猝灭的性质进行痕量金属离子测定．